一例 38 岁的男性患者，因车祸伤后植物生存状态 23 个月来院，在外院曾因双侧额颞顶叶挫裂伤、脑内血肿急诊行双侧开颅血肿清除、去骨瓣减压术，伤后一直昏迷。

病例摘要及诊疗分析

现病史

患者男，38 岁，因“车祸伤后持续昏迷 23 个月”入院。

23 个月前因车祸中头部受撞击致深昏迷，在外院急诊行头颅 CT 示双侧额颞顶叶挫裂伤、脑内血肿，急诊行双侧开颅血肿清除、去骨瓣减压术，伤后 11 个月以来一直处于植物生存状态。

查体：Glasgow 评分 6 分，植物生存状态，气管切开，双侧瞳孔直径 3 mm，对光反射迟钝，颈项强直，四肢肌张力明显增高伴阵发性抽搐，双侧病理征阳性，原始反射阳性，尿失禁。头颅 CT 示：双侧额叶及枕叶、右侧顶叶及颞叶、脑干多处大片状软化灶。

分析：患者处于一种特殊的意识障碍，与长期昏迷、低反应状态及脑死亡不同，符合植物状态诊断标准，他认知功能完全丧失，丘脑下部及脑干功能基本保存。

既往史

既往体健，否认高血压、冠心病、糖尿病病史。

诊疗经过

经过 1 年的神经营养、间断应用安宫牛黄丸、高压氧、针灸、按摩等综合促醒治疗，仍处于植物生存状态，应用肌松剂之后四肢肌张力增高仍未缓解。PET- CT 示：双侧颞叶、枕叶、右侧顶叶、颞叶多发脑软化灶葡萄糖代谢缺损。神经电生理检查结果：移植前脑电图为高度异常脑电图（限局性左侧前额、额、前、中颞导病理波及左侧前头部导慢波灶）。移植前体感诱发电位检查：双正中神经 N20 波及双胫神经 P40 波均消失。

分析：经过长时间观察可以判定患者为持续性植物状态（Persistent Vegetative State，PVS），目前常用的促醒方法改善其意识障碍的可能性很小。近年来干细胞移植逐渐成为神经科学研究的热门，并逐渐为临床所采用，成为脑损伤患者治疗的希望。骨髓间充质干细胞具有高度增殖并分化为神经细胞的能力，作者采用患者自体骨髓间充质干细胞进行移植，从而达到提供神经元并促进内源神经干细胞分化的目的，以观察干细胞对颅脑损伤后 PVS 患者的治疗作用。

细胞获取及鉴定方法

获取骨髓间充质干细胞：穿刺患者髂后上棘取骨髓 5 min，无菌条件下用 0.5 ml 肝素抗凝，立即转移至 1：1000 级层流无菌实验室，等量的 L-DMEM 培养基稀释，在 10 ml 离心管内加入 Percoll 细胞分离液 (1.073g／ml)5 ml，加入 5 ml 骨髓液。2500 转／分离心 20 分钟，吸取分界面的白色絮状细胞层，用磷酸缓冲液（PBS）混匀，1000 转／分离心 5 分钟，同法再洗涤 1 次，加入盛有 5 mlDMEM／F12 培养基的塑料培养瓶，置入 37。C、5％的 CO2 孵箱培养。

1 周后细胞在 DMEM/F12+15% 胎牛血清的培养基中贴壁生长，见图 1。对所获得的细胞进行表面标志的组化染色表明，培养的细胞具有骨髓干细胞独特的表型特征，即 CD105 阳性和 CD34 阴性，见图 2。

图 1  CD105 表面抗原

图 2   CD34 表面抗原